Определение афлатоксина М1 в молоке с помощью оборудования компании KNAUER

19.10.2018
Быстрый изократический метод с твердофазной экстракцией, флуоресцентным детектированием и послеколоночной дериватизацией с применением фотохимического реактора UVE.

Афлатоксины являются наиболее известной группой микотоксинов (естественные грибные яды) и могут накапливаться в сельскохозяйственных культурах при хранении сельскохозяйственной продукции, особенно в теплых и влажных условиях. Максимальный уровень афлатоксина М1, установленный Управлением по контролю за продуктами и лекарствами США и Европейской комиссией, составляет 0,5 мкг/л. В данной статье приведено описание быстрого изократического метода, применимого для обнаружения афлатоксина M1 на требуемом уровне концентраций.

С целью решения поставленной задачи был разработан аналитический метод с использованием следующего стандартного решения: стандартная концентрация раствора афлатоксина M1 – 1 мкг/мл, флуоресцентное детектирование, дериватизациая колонок с помощью фотохимического реактора UVE.

Чтобы удостовериться, что метод позволяет обнаруживать афлатоксин M1 на уровне концентраций, соответствующих установленным законодательным требованиям, в пробу молока был введен афлатоксин М1 до достижения концентрации 0,5 мкг/л, после чего проба подвергалась предварительной подготовке посредством твердофазной экстракции в режиме реального времени (SPE). На рисунке 1 показано наложение результатов анализа меченой пробы молока после ее предварительной подготовки и стандарта афлатоксина М1.

Несмотря на проявление матричных эффектов в результате предварительной обработки методом твердофазной экстракции, предлагаемый метод обеспечил необходимую точность при количественной оценке пробы молока с концентрацией афлатоксина M1 на уровне 0,5 мкг/л. При предварительной подготовке пробы методом твердофазной экстракции 20 мл сырого молока разбавляли 30 мл дистиллированной воды. Колонку CHROMABOND® C18 ec SPE кондиционировали 10 мл воды и 10 мл н-гексана. Затем колонку просушивали в течение 10-20 мин при 50°С либо оставляли на ночь при температуре окружающей среды. После сушки образец элюировали с применением 3 мл ацетонитрила.


51562.jpg

Рисунок 1. Наложение результатов анализа пробы молока меченой M1 после твердофазной экстракции (красный график) и стандарта M1 (синий график).


Поставленная задача решалась с помощью ВЭЖХ системы AZURA® Analytical HPLC Plus, состоящей из градиентного насоса низкого давления AZURA®P 6.1L, автоматического пробоотборника 3950, термостата колонки CT 2.1, фотохимического реактора UVE и флуоресцентного детектора RF-20Axs. Аналитический метод выполнялся в изократическом режиме при скорости потока 0,8 мл/мин со смесью воды, метанола и ацетонитрила 60:25:15. Термостат колонки был установлен на 30°C, длина волны возбуждения детектора составляла 365 нм / излучения – 455 нм. На системе было задано высокое значение чувствительности с коэффициентом усиления, равным 16. Используемая колонка была заполнена силикагелем KNAUER Eurospher II 100-3 C18.

Комплекс оборудования в составе фотохимического реактора UVE для послеколоночной дериватизации в сочетании с ВЭЖК системой AZURA® Analytical HPLC и флуоресцентным детектированием обеспечил количественную оценку афлатоксина M1 в молоке и других молочных продуктах на уровне установленного законодательством предельного значения 0,5 мкг/л.
Вернуться обратно
ОПУБЛИКОВАТЬ В СОЦ.СЕТЯХ