Производитель: GE Healthcare Life Sciences (США)
Вы можете оставить заявку на данный товар и наш менеджер обязательно с вами свяжется

Описание:

Аффинные среды Ni Sepharose excel для захвата и очистки гистидин-меченных белков, секретируемых в супернатантах культуры эукариотических клеток, методом аффинной хроматографии на иммобилизованных ионах металла (IMAC).

  • Загружайте образцы культур эукариотических клеток, содержащие секретированные белки, меченные гистидином, непосредственно с сохранением связывающей способности
  • Увеличьте выход целевого белка и уменьшите деградацию за счет упрощения процесса работы с образцами
  • Выберите из нескольких форм выспуска для скрининга и препаративной очистки белков, меченных гистидином

Ni Sepharose excel представляет собой среду аффинной хроматографии на иммобилизованных ионах металла (IMAC), предварительно заряженную ионами никеля, связанную сильной связью с хелатным лигандом. Поэтому в среду можно загружать образцы, которые обычно вызывают снятие ионов металла. Как было показано, ионы никеля остаются связанными с хелатообразующим лигандом даже после инкубации в течение 24 часов в 10 мМ ЭДТА. Реактив Ni Sepharose excel предназначен, главным образом, для захвата и очистки гистидин-меченых белков, секретируемых в супернатанты клеточной культуры из эукариотических клеток, таких как клетки насекомых или клетки яичника китайского хомячка (СНО).

Ni Sepharose excel позволяет осуществлять непосредственную загрузку образцов без необходимости проведения длительных и затратных по времени процедур предварительной обработки. Свойства потока среды делают ее превосходной для очистки в широком диапазоне шкал и позволяют загружать большие объемы проб, позволяя производить очистку низких концентрации целевых белков при больших объемах.

Код продукта: 17-3712-01, 17-3712-02, 17-3712-03

 

Данные о продукте

Размер частиц, d50V

90 мкм1)

Матрица

Высокосшитая агароза, 6%

Связывающая способность/мл хроматографической среды

Не менее 10 мг гистидин-меченого белка2)

Емкость иона металла

От 54 до 70 мкмоль Ni2+/мл среды

Рабочий диапазон стабильности pH

2-123)

Стабильность pH, CIP (при "очистке на месте")

2–144)

Стабильность pH, очистка на месте

2-145)

Скорость потока

150 см/ч - 600 см/ч6)

Условия хранения

4 - 30 °С, 20% этанол

Химическая стабильность

0,01 М HCl и 0,01 М NaOH (одна неделя); 10 мМ ЭДТА, 5 мМ ДТТ, 1 М NaOH, 5 мМ TCEP, 20 мМ β-меркаптоэтанола и 6 М гуанидин-HCl (24 часа); 500 мМ имидазола и 100 мМ ЭДТА (2 часа); 30% 2-пропанола (20 минут).7)

1)d50v - средний размер частиц кумулятивного распределения объема.

2) Динамическую связывающую способность тестировали с 0,5 мг / мл чистого белка, меченного (гистидином)6 (Mr 43 000) в среде EX-CELL™ 420 без сыворотки насекомых (емкость при 10% прорыве (проскоке)) или (гистидин)6-меченного белка (Mr 28 000). Объем колонки составил 1 мл и скорость потока - 1 мл / мин. Связывающая способность зависит от образца.

3) Рабочий диапазон: рН, при котором среду можно использовать без существенного изменения ее характеристик.

4) Очистка на месте: диапазон рН, при котором среду можно подвергнуть очистке на месте без значительного изменения ее свойств.

5)Очистка на месте: диапазон рН, при котором среду можно подвергнуть очистке на месте без значительного изменения ее свойств.

6) H2O при комнатной температуре.
Для вязких буферов и образцов скорость потока следует оптимизировать. Рекомендуется начать с низкой скорости потока.
Оптимальная скорость потока во время связывания зависит от образца. Во время промывки колонки и элюирования рекомендуемая скорость потока составляет 150 см/ч. Не превышайте 150 см/ч во время очистки на месте.

7)Химическая стабильность тестировалась путем инкубации среды в указанных растворах при комнатной температуре, а затем измеряли как утечку никеля, так и способность к связыванию белка.