
Колонки HisTrap excel предварительно заполнены аффинной средой Ni Sepharose excel для захвата и очистки гистидин-меченых белков, секретируемых в супернатантах культуры эукариотических клеток, методом аффинной хроматографии на иммобилизованных ионах металла (IMAC).
HisTrap excel 1 мл и 5 мл являются готовыми к применению колонками для хроматографии на иммобилизованных ионах металла (IMAC), предварительно заполненные никель-сефарозой Ni Sepharose excel. Конструкция колонок в сочетании со специфическими свойствами среды обеспечивает быструю и удобную очистку. Специальный тип фильтра в верхней и нижней частях колонок позволяет загружать большие объемы бесклеточных, неочищенных образцов непосредственно на колонки, не вызывая проблем с обратным давлением. Это свойство, экономящее время, помогает предотвратить деградацию и потерю чувствительных белков-мишеней.
Код продукта: 29-0485-86, 17-3712-05, 17-3712-06
HisTrap excel, 1 мл
Размеры слоя |
7 мм × не применимо |
Объем слоя |
1 мл |
Связывающая способность/колонка |
Не менее 10 мг гистидин-меченого белка/мл осажденной среды.1) |
Условия хранения |
4 - 30 °С, 20% этанол |
Макс. давление [Над наполненным слоем во время работы] |
Не применимо |
1) Динамическую связывающую способность тестировали с 0,5 мг / мл чистого белка, меченного (гистидином)6 (Mr 43 000) в среде EX-CELL™ 420 без сыворотки насекомых (емкость при 10% прорыве (проскоке)) или (гистидин)6-меченного белка (Mr 28 000). Объем колонки составил 1 мл и скорость потока - 1 мл / мин. Связывающая способность зависит от образца. |
Размер частиц, d50V |
90 мкм1) |
Матрица |
Высокосшитая агароза, 6% |
Связывающая способность/мл хроматографической среды |
Не менее 10 мг гистидин-меченого белка2) |
Емкость иона металла |
От 54 до 70 мкмоль Ni2+/мл среды |
Рабочий диапазон стабильности pH |
2–123) |
Стабильность pH, CIP (при "очистке на месте") |
2–144) |
Условия хранения |
4 - 30 °С, 20% этанол |
Химическая стабильность |
0,01 М HCl и 0,01 М NaOH (одна неделя); 10 мМ ЭДТА, 5 мМ ДТТ, 1 М NaOH, 5 мМ TCEP, 20 мМ β-меркаптоэтанола и 6 М гуанидин-HCl (24 часа); 500 мМ имидазола и 100 мМ ЭДТА (2 часа); 30% 2-пропанола (20 минут).5) |
1)d50v - средний размер частиц кумулятивного распределения объема. |
|
2) Динамическую связывающую способность тестировали с 0,5 мг / мл чистого белка, меченного (гистидином)6 (Mr 43 000) в среде EX-CELL™ 420 без сыворотки насекомых (емкость при 10% прорыве (проскоке)) или (гистидин)6-меченного белка (Mr 28 000). Объем колонки составил 1 мл и скорость потока - 1 мл / мин. Связывающая способность зависит от образца. |
|
3) Рабочий диапазон: рН, при котором среду можно использовать без существенного изменения ее характеристик. |
|
4) Очистка на месте: диапазон рН, при котором среду можно подвергнуть очистке на месте без значительного изменения ее свойств. |
|
5) Химическую стабильность тестировали путем инкубации среды в указанных растворах при комнатной температуре, а затем измеряли как утечку никеля, так и способность к связыванию белка. |
Внутр. диам. колонки |
7 мм |
Размеры слоя |
7 мм × не применимо |
Форма выпуска |
1 мл |
Материал изготовления [оснастка колонки] |
Полипропилен (ПП) |
HisTrap excel, 5 мл
Размеры слоя |
16 мм × не применимо |
Объем слоя |
5 мл |
Связывающая способность/колонка |
Не менее 10 мг гистидин-меченого белка/мл осажденной среды.1) |
Условия хранения |
4 - 30 °С, 20% этанол |
Макс. давление [Над наполненным слоем во время работы] |
Не применимо |
1) Динамическую связывающую способность тестировали с 0,5 мг / мл чистого белка, меченного (гистидином)6 (Mr 43 000) в среде EX-CELL™ 420 без сыворотки насекомых (емкость при 10% прорыве (проскоке)) или (гистидин)6-меченного белка (Mr 28 000). Объем колонки составил 1 мл и скорость потока - 1 мл / мин. Связывающая способность зависит от образца. |
Размер частиц, d50V |
90 мкм1) |
Матрица |
Высокосшитая агароза, 6% |
Связывающая способность/мл хроматографической среды |
Не менее 10 мг гистидин-меченого белка2) |
Емкость иона металла |
От 54 до 70 мкмоль Ni2+/мл среды |
Рабочий диапазон стабильности pH |
2–123) |
Стабильность pH, CIP (при "очистке на месте") |
2–144) |
Условия хранения |
4 - 30 °С, 20% этанол |
Химическая стабильность |
0,01 М HCl и 0,01 М NaOH (одна неделя); 10 мМ ЭДТА, 5 мМ ДТТ, 1 М NaOH, 5 мМ TCEP, 20 мМ β-меркаптоэтанола и 6 М гуанидин-HCl (24 часа); 500 мМ имидазола и 100 мМ ЭДТА (2 часа); 30% 2-пропанола (20 минут).5) |
1)d50v - средний размер частиц кумулятивного распределения объема. |
|
2) Динамическую связывающую способность тестировали с 0,5 мг / мл чистого белка, меченного (гистидином)6 (Mr 43 000) в среде EX-CELL™ 420 без сыворотки насекомых (емкость при 10% прорыве (проскоке)) или (гистидин)6-меченного белка (Mr 28 000). Объем колонки составил 1 мл и скорость потока - 1 мл / мин. Связывающая способность зависит от образца. |
|
3) Рабочий диапазон: рН, при котором среду можно использовать без существенного изменения ее характеристик. |
|
4) Очистка на месте: диапазон рН, при котором среду можно подвергнуть очистке на месте без значительного изменения ее свойств. |
|
5) Химическую стабильность тестировали путем инкубации среды в указанных растворах при комнатной температуре, а затем измеряли как утечку никеля, так и способность к связыванию белка. |
Внутр. диам. колонки |
16 мм |
Размеры слоя |
16 мм × не применимо |
Форма выпуска |
5 мл |
Материал изготовления [оснастка колонки] |
Полипропилен (ПП) |